在众多提取RNA的试剂盒中，Trizol作为提取总RNA的经典试剂，也一直备受青睐。

无论是人、动物、植物还是细菌，TRzol试剂(RA101)对少量及大量的组织和细胞均有较好的分离效果。TRzol试剂(RA101)操作上的简单性允许同时处理多个样品，所有的操作可以在一小时内完成，并能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。

但是Trizol试剂提取过程中需要氯仿的抽提，而氯仿具有较强毒性，易挥发。因此，找到一种能够替代氯仿的试剂尤为重要。博迈德氯仿替代物(RA118)可以解决这一问题。

1.样本预处理后，加1mL TRzol试剂，裂解样本，室温孵育5min。

2.加 0.1mL 氯仿替代物，振荡混匀，孵育3min。

3.在4℃/室温下12000×g离心样本15min。

4.取上层水样层约500μL至新样本管中。离心后混合物分成三层：下层有机层，中间层，上层无色的水样层。RNA存在于上层水样层当中。

5.加等样本体积的异丙醇，颠倒混匀，室温下孵育10min。

6.在4℃/室温下12000×g离心10min，弃上清。

7.加1mL 75%乙醇洗涤沉淀，在4℃/室温下12000×g离心3-5min，弃上清液。此步骤重复一次。

注意：剩余的少量液体可短暂离心，然后用枪头吸出，注意不要吸弃沉淀。

8.室温干燥3-5min，加20-50μL RNase-free H2O，充分溶解沉淀。(可在55°C水浴加速溶解。)