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氯仿替代物---解决无氯仿提取RNA问题

发布者:博迈德生物2024-06-0474

在众多提取RNA的试剂盒中,Trizol作为提取总RNA的经典试剂,也一直备受青睐。




无论是人、动物、植物还是细菌,TRzol试剂(RA101)对少量及大量的组织和细胞均有较好的分离效果。TRzol试剂(RA101)操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成,并能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。


但是Trizol试剂提取过程中需要氯仿的抽提,而氯仿具有较强毒性,易挥发。因此,找到一种能够替代氯仿的试剂尤为重要。博迈德氯仿替代物(RA118)可以解决这一问题。

氯仿替代物优点

1. 可以完全替代氯仿,无需额外步骤。

2. 高性价比,用量少,低毒,高效。

3. 对RNA提取与后续实验无影响。


使用方法:


1.样本预处理后,加1mL TRzol试剂,裂解样本,室温孵育5min。


2.加 0.1mL 氯仿替代物,振荡混匀,孵育3min。


3.在4℃/室温下12000×g离心样本15min。


4.取上层水样层约500μL至新样本管中。离心后混合物分成三层:下层有机层,中间层,上层无色的水样层。RNA存在于上层水样层当中。


5.加等样本体积的异丙醇,颠倒混匀,室温下孵育10min。


6.在4℃/室温下12000×g离心10min,弃上清。


7.加1mL 75%乙醇洗涤沉淀,在4℃/室温下12000×g离心3-5min,弃上清液。此步骤重复一次。


注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。


8.室温干燥3-5min,加20-50μL RNase-free H2O,充分溶解沉淀。(可在55°C水浴加速溶解。)



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