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新品丨核酸检测核心原料酶--UDG酶
发布者:博迈德生物2022-11-2253
在新冠核酸检测过程中,环境中的气溶胶污染极易造成PCR结果假阳性,在扩增体系中加入UDG酶(尿嘧啶DNA糖基化酶Uracil DNA Glycosylase)可有效消除PCR体系中混入的扩增残留污染物,保证扩增结果的准确性。本文为大家介绍一下这款核酸检测中最关键的核心原料--UDG酶。
博迈德生物热敏UDG酶Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase(货号:AT113)在25-37℃发挥活性,热敏感,50℃ 10 min或95℃ 2 min即发生不可逆灭活。无核酸内外切酶和RNase残留,宿主菌基因组残留低于10拷贝,与热启动Taq DNA聚合酶搭配使用,可保证扩增反应的特异性。
博迈德生物热敏UDG酶(Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase)通过切割尿嘧啶碱基与糖骨架之间的 N-糖苷键,从含 dU的DNA 中去除尿嘧啶。该切割生成敏感的无嘧啶位点,在高温和碱性条件下,脱碱基位点易发生水解,导致DNA链断裂成小片段。该酶对RNA和不含有尿嘧啶的DNA无作用。热敏UDG对热敏感,50℃以上的温度下可迅速完全失活。通过在核酸扩增预混液中添加热敏UDG酶,能够有效消除扩增产物的片段污染,防止核酸扩增(PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR和LAMP等等)假阳性。
货号 | 名称 | 规格 |
AT113-01 | Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase | 1000U |
基因工程大肠杆菌表达的热敏UDG重组酶。
一个单位的尿嘧啶DNA糖基化酶定义为在37℃下60分钟内完全降解1μg纯化的单链尿嘧啶DNA所需的酶量。
SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无核酸外切酶、核酸内切酶和核糖核酸酶活性,无细菌基因组DNA残留。
1.核酸扩增实验中扩增产物污染的预防与清除。
2.DNA中去除尿嘧啶碱基
10×Taq Buffer :100 mM Tris-HCl,500 mM KCl,20 mM MgCl2,pH 8.8 @ 25°C)
储存缓冲液:10 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,1 mM DTT,0.1 mM EDTA,50% Glycerol, pH 7.5 @ 25°C
产品介绍:
博迈德Uracil-DNA Glycosylase(UDG 酶)来源于大肠杆菌表达的重组大肠杆菌尿嘧啶-DNA糖基化酶,可催化含尿嘧啶(U)的 DNA 释放游离的尿嘧啶,对 RNA 无活性。UDG酶能有效水解单链或双链 DNA 中的尿嘧啶,但不能水解小于6bp的寡脱氧核苷酸中的尿嘧啶。UDG 酶主要用于防止或清除 PCR扩增产物的污染。
作用原理:
作用原理是在 PCR反应中以 dUTP替代 dTTP 掺入 DNA 中形成含 dU 碱基的 PCR 扩增产物,此扩增 DNA 产物中 dU 碱基的糖苷键被 UDG酶切掉生成无嘧啶位点,失去 dU 碱基处极不稳定,在随后的加热步骤中DNA被断裂降解。
货号 | 名称 | 规格 |
AT114-01 | Uracil-DNA Glycosylase UDG酶 | 1000U |
AT114-02 | 1000U×5 |
货号 | 名称 | 特点 |
MT503 | qPCR MasterMix with UDG (Probe) | 探针法多重qPCR,特异性高、适合多重PCR,扩增效率高,含UDG防污染体系。引物与酶混合后37度可保存2周。 |
MT502 | qPCR MasterMix(Probe) | 探针法多重qPCR,特异性高、适合多重PCR,扩增效率高。引物与酶混合后37度可保存2周。 |
AT302 | M-MLV Ⅲ Reverse Transcriptase(200U/ul) | 该酶可在37℃-55℃条件下合成第一链cDNA,具有灵敏度高,特异性高,热稳定性高和半衰期长的特点。 |
MT521 | Green qPCR MasterMix | 灵敏度高、特异性强、扩增效率高,适用于任何荧光定量qPCR仪。 |
MT612 | M-MLV III Green One-Step qRT-PCT Kit | 合成能力高、热稳定性好、半衰期长。灵敏度高,在同一管中只需加引物模板即可进行qPCR,适用于任何荧光定量qPCR仪器。 |
MT701 | M-MLV One-Step RT-qPCR(Probe) Kit | 具有热启动,检测精确度更高,灵敏度更高的特点。引物与酶混合后37度可保存2周。 |
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