T5 核酸外切酶

产品组成：

保存条件：-20℃

产品简介：

T5 核酸外切酶沿 5’→3’方向降解 DNA。它既能从 5’末端起始消化，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化。但不能降解超螺旋双链 DNA。T5 核酸外切酶还具有单链 DNA 核酸内切酶活性。

来源：

纯化自含有 T5 噬菌体 D15 基因质粒的 E.coli 菌株，有6His 标签。

单位定义：

一单位指在 CutSmart 反应缓冲液中，37℃ 条件下，每分钟引起 0.00032 A260 nm 变化所需要的酶量。

10×T5 Exo Buffer：500 mM Potassium Acetate，200 mM Tris-acetate，100 mM Magnesium Acetate，10 mM DTT，pH 7.9。

Storage Buffer：50 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，0.1% Triton® X-100，pH 7.5。

产品特点：

1. 降解线性单链、双链 DNA 或切刻质粒 DNA，但对超螺旋质粒 DNA 不起作用。

2. 去除碱裂解质粒提取过程中产生的变性 DNA。

3. 提高小提制备的cDNA 文库质粒的转染效率。

产品应用：

1. 从完全连接的环状双链 DNA 中，去除不完全连接产物；

2. 降解碱裂解质粒提取方法中产生的变性 DNA，增加超螺旋 DNA 比例，提高 DNA 克隆和转染效率；

3. 降解质粒样品中污染的线性化和切刻 DNA ；

4. Gibson基因片段组装。

操作方法：

1. 推荐反应体系

2. 37℃温育30分钟。

3. 加入EDTA至总浓度为11mM，终止反应。

注意事项：

1. 该酶在PCR Buffer中也具有活性。
2. 该酶的最佳反应温度为37°C，在50°C也具有一定活性，因此可用于Gibson组装。