T4原理克隆载体
pBM22快速克隆试剂盒
发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-024445
保存条件:-20℃保存
产品介绍:
pBM22快速克隆试剂盒为一种阳性选择克隆系统,克隆区域位于pBM22质粒的自杀基因(lethal gene)内部。当连接产物转化大肠杆菌后,有外源片段的插入的重组质粒导致载体上的自杀基因功能丧失,细菌存活,无片段连接(载体自连)时,自杀基因表达的毒蛋白使细菌不能存活。该试剂盒利用T4 DNA 连接酶(T4 DNA ligase)的连接活性将平末端DNA片段克隆到具有磷酸化末端的线性化载体pBM22中。
适用于克隆由Pfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5等高保真DNA聚合酶扩增的平末端PCR产物或各种方法产生的平末端双链DNA片段。由Taq、Tth和klenTaq等DNA聚合酶扩增的非平末端PCR产物,可通过平末端化酶(Blunting Enzyme)处理成为平末端DNA用于连接。阳性克隆可以用试剂盒提供的引物PBM22F和PBM22R进行菌落PCR或测序鉴定。
产品特点:
(1)连接反应仅需5-30分钟。
(2)适用于平末端PCR产物和平末端双链DNA片段。
(3)适用于磷酸化或非磷酸化的DNA片段,克隆位点两侧无酶切位点。
(4)pBM22为氨苄抗性,具高拷贝复制起始子。
(具体操作详见说明书)
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