荧光定量PCR

M-MLV One-Step RT-qPCR(Probe) Kit

发布者：博迈德生物发布时间：2018-02-011356

货号	产品名称	规格	价格（元）	说明书下载
MT701-01	M-MLV One-Step RT-qPCR(Probe) Kit	20μl×100 rxns	1200

【试剂盒组成】

组分	MT701-01 (20 μl×100 rxns)
2 ×One-Step RT-qPCR Buffer	1 ml
Taq HS(5U/μl)	40 μl
RT Enzyme Mix	40 μl
H2O(RNase free)	1 ml

【贮藏及有效期】 试剂盒-20℃以下冷冻避光保存，有效期为 12 个月

【产品简介】

采用了探针法 (TaqMan) 一步RT-qPCR 方案。反转录与qPCR 反应在同一反应体系中连续进行，反应中不需添加任何试剂，操作简单，并能有效防止污染。RT Enzyme Mix含有反转录酶与RNA酶抑制剂，Taq HS(5U/μl)为抗体修饰的Taq酶，具有热启动，检测精确度更高，灵敏度更高的特点。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对多种丰度的靶基因进行准确定量检测，重复性好，可信度高。

【产品特点】

1.RT Enzyme Mix含有反转录酶与RNA酶抑制剂，可对微量RNA进行反转录。

2.qPCR使用了Taq HS(5U/μl)，可以进行热启动法PCR反应，与产品Buffer系统结合，具有扩增效率高，灵敏度高的特点。

3.只能使用特异引物，不能使用Oligo(dT)和Random Primer。

【使用方法】

配制反应体系

成分	体积	终浓度
2×One-Step RT-qPCR Buffer	10 μl	1 ×
Taq HS(5U/μl)	0.4 μl
RT Enzyme Mix	0.4 μl
PCR Forward Primer (10 μM)	0.4 μl	0.2 μM *¹
PCR Reverse Primer (10 μM)	0.4 μl	0.2 μM *¹
Probe	0.4 μl*²
RNA模板	2 μl*³
H₂O(RNase free)	To 20 μl

*1 通常引物终浓度为 0.2 μM 可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在 0. 1~1.0 μM 范围内调整引物浓度。

*2 探针浓度与使用的 Real Time PCR 扩增仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行。

*3 模板使用量依据具体实验而定，建议RNA 使用量在10 pg- 100 ng。

实验图例

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