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BC215-01	【新品】ClearColi BL21(DE3)	100ul×10	1800

储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。

产品介绍：

脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)是几乎所有革兰氏阴性细菌外膜的一种成分。LPS被哺乳动物免疫细胞上的TLR4/MD-2识别，从而激活NF-kappB信号通路，导致生物体炎症反应的发生。大肠杆菌基因工程产品中的残留的LPS会极大地影响下游实验。ClearColi系列大肠杆菌的细菌外膜上为修饰后的类脂IVA((Lipid IVA )，与野生型的LPS相比，缺乏寡糖链和两条二级酰基链，类脂IVA不能诱导活化的hTLR4/MD-2复合物的形成，避免了LPS-TLR4/NF-kB信号通路的内毒素反应。此外，不含寡糖的类脂IVA更易从重组蛋白中去除。

ClearColi BL21（DE3）细胞的生长速度约为正常BL21（DE3）细胞的50%。转化后的菌落在最初24小时内显得非常小。建议转化后的平板先培养皿培养36-48小时实验再挑菌落进行实验。诱导前，需要更长的生长时间才能达到所需的细胞密度。

pUC19质粒检测感受态细胞的转化效率大于10 ⁵ cfu/μg。

基因型：F- ompT hsdSB (rB - mB -) gal dcm lon λ(DE3 [lacI lacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5]) msbA148 ∆gutQ ∆kdsD ∆lpxL ∆lpxM ∆pagP ∆lpxP ∆eptA

产品特点：

用于表达低内毒素的重组蛋白。该菌株含有T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，适用于含有T7启动子的原核表达载体（如pET等）和非T7启动子的表达载体（如pGEX，pMal，pTrc等载体）在原核系统中的高效表达。

菌株抗性：对氨苄青霉素，卡那霉素，壮观霉素，氯霉素，链霉素和四环素敏感。

质粒转化步骤：  

1. 将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入目的质粒到细胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀；

2.冰水浴中放置 30 分钟，不要晃动；

3.42℃热击 60 秒钟，不要晃动；

4. 冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动；

5. 加入500μl 无菌的 LB 培养基；

6. 置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟；

7. 取100-200μl左右的菌液或稀释后的菌液，涂布于含相应抗生素的LB平板上，倒置放于 37℃培养箱培养36-48小时。

详情见说明书