克隆相关
T4 DNA Ligase
发布者:博迈德生物发布时间:2018-02-026595
浓 度: 5U/μl
产品概述:
在有Mg2+和ATP存在的条件下,T4 DNA Ligase能催化双链 DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻,但不能催化单链 DNA 之间的连接。
保存条件:-20℃保存。
酶储存缓冲液:
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ,50mM KCl,1mM DTT, 0.1mM EDTA,50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5), 50mM MgCl2,50mM DTT, 5mM ATP,连接促进剂。
来 源:纯化于携带T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。
抑制剂和热失活:
大于200mM的NaCl或KCl可以强烈抑制连接酶活性。65℃加热 10分钟或70℃加热5分钟即可失活。
单位定义:
在37℃,20分钟内交换1 nmole 的32PPi所需要的酶量定义为一个Weiss单位。本产品酶1U(Weiss Unit)相当于200个粘性末端单位。在T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃条件下,30分钟能够使50%的经Hind III消化的λDNA 片段连接所需要的酶量为一个粘性末端单位。
质量控制:
蓝白斑分析实验表明白斑数小于2%;过量T4 DNA Ligase 混合超螺旋质粒检测实验表明无核酸酶检出;SDS-PAGE检测重组蛋白纯度大于99%。
(具体操作详见说明书)
- •【新品】博迈德封板膜(自粘型)...
- •【新品】博迈德封板膜(压敏型)...
- •【新品】单体亲和素磁珠...
- •【新品】Thermolabile Uracil-DNA Glycosylase热敏UDG酶...
- •Protein L Magnetic Beads蛋白L磁珠...
- •Protein G Magnetic Beads蛋白G磁珠...
- •Protein A Magnetic Beads 蛋白A磁珠...
- •pBM28 Toposmart 克隆试剂盒...
- •Benzonase Nuclease 全能核酸酶...
- •核酸提取或纯化试剂(病毒DNA/RNA 纯化试剂盒(快速磁珠法))...
- •核酸提取或纯化试剂(病毒DNA/RNA纯化试剂盒(磁珠法))...
- •清洗液...
- •Ribonuclease A (RNase A)干粉...
- •dam-/dcm-感受态细胞...
- •【新品】GV3101(pSoup)农杆菌感受态细胞...