服务概述

    合成速度快，纯度高，质量好。

服务简介

    近年来，随着生物工程技术的迅猛发展，人工合成Oligo DNA的需求量也越来越大，已经成为分子生物学实中最基础的试剂之一。因此，合成Oligo DNA的质量的优劣，将会直接影响到科研人员实验计划是否能顺利进。所以，使用高质量的合成Oligo DNA制品就变得尤为重要。

    Biomed已有近十年合成Oligo DNA制品的经验，为国内客户提供了数以万计的高品质的Oligo DNA合成制品，成功地应用于分子生物学的各个领域，受到了客户的一致好评，赢得了良好的声誉，成为用户信赖的首选品牌。

    Biomed合成Oligo DNA制品有如下特点：

    ①仪器好：美国进口ABI3900和MerMade 192合成仪，除合成量可成规模外，合成纯度高。

    ②质量高：使用试剂均为原装进口，可保证合成高质量的DNA制品。

    ③纯度高：在MerMade 192合成仪纯度高的基础上又推出OPC纯化、PAGE纯化两种级别制品，客户可根据实验需要进行选择。我们保证对每个制品都进行严格的质量检测。

    ④速度快：保证当天的订单当天合成，OPC纯化制品2天内发货，PAGE纯化制品3天内发货。

DNA合成原理

    化学合成的基本过程便是在合成过程中尽可能的将不需要的基团暂时保护起来，在一轮缩合反应之后，再将上一轮基团上的保护基选择性的脱下来，以形成专一的磷酸二酯键。目前主要使用的是固相亚磷酰胺三酯法。对此方法的最简单描述是：溶液中的单体通过缩合反应形成3'→5'磷酸二酯键从而连接到固相支持物上。下面是较详尽的描述：

    反应步骤

    第一步：去封闭（Deblocking），用三氯乙酸（TCA）去除CPG所连核苷上的DMT,以暴露5 '羟基，供下一步缩合。此步需要注意TCA为一较强的酸，可能会有脱嘌呤作用,故TCA与寡核苷酸接触时间不要超过规定时间。

    第二步：活化(Activation),在缩合之前，单体与四唑混合并进入合成柱，此时四唑提供一个质子给3'磷酸上二异丙胺基的N原子，质子化的二异丙胺是一个良好的游离基团，与四唑形成亚磷酰胺四唑这种活性中间体。此步四唑过量保证了单体活化充分。

    第三步：连接(Coupling)，亚磷酰胺四唑与CPG所连的核苷酸碰撞时，与其5 '羟基发生亲核反应，发生缩合并脱掉四唑，合成的寡核苷酸链延伸一个核苷酸单体。此步单体相对于CPG所连核苷酸上5 ' -羟基过量保证了连接的高效率。

    第四步：盖帽(Capping),为了防止未反应的与CPG相连的5 '羟基在随后的循环中被延长，需要在连接反应充分进行之后使之封闭，常用乙酰化来封闭此羟基。临用前混合乙酸酐和N-甲基咪唑等形成一活性很强的乙酰化试剂，与少量未参与连接反应的5 '羟基缩合成酯键。

    第五步：氧化(Oxidation)，连接反应后新加上的核苷酸单体通过亚磷酯键（磷为三价）与CPG上相连的寡核苷酸链连接，此亚磷酯键不稳定，易被酸、碱水解，因此需将此处三价磷氧化为五价的磷。常用的氧化剂为碘的四氢呋喃溶液。

    循环上述一至五步，寡核苷酸链即可延伸至所需长度。合成过程中可以观察TCA处理阶段的颜色判定合成效率。

    合成后处理

    切割与脱保护基：将合成好的寡核苷酸链从支持物上化学切割下来。常用新鲜的浓氨水来裂解CPG与初始核苷间的酯键。断裂下来的寡核苷酸带有自由的3 '羟基。

    纯化：根据所合成寡核苷酸的组成和应用来选定纯化的方法。常用的纯化方法有：C18柱、OPC柱、PAGE和HPLC。本公司暂时不提供HPLC纯化。

    定量：根据寡核苷酸在260nm处的紫外吸收来定量。

    储存：分装抽干。

Biomed DNA合成制品

    Biomed DNA合成部提供普通DNA合成制品、长链DNA合成制品、修饰DNA合成制品及标记DNA合成制品。普通DNA合成制品分别有OPC纯化、PAGE纯化二种级别，您可以根据实验需要选择使用合适级别的制品。